過氧化氫測試盒操作簡便、靈敏度高
更新時間:2026-03-25 | 點擊率:517
過氧化氫測試盒是一種廣泛應(yīng)用于生物學(xué)、醫(yī)學(xué)及化學(xué)研究領(lǐng)域的工具,主要用于檢測生物樣本中過氧化氫的濃度。其工作原理基于特定的化學(xué)反應(yīng)與光學(xué)檢測技術(shù)的結(jié)合,具有操作簡便、靈敏度高等優(yōu)點。
1.比色法:較常用原理,HO在過氧化物酶催化下,氧化顯色底物生成有色化合物,產(chǎn)物吸光度(450nm/530nm等)與HO濃度成正比,特異性高、靈敏度強,是科研優(yōu)選方法。HO與相酸銨反應(yīng)生成穩(wěn)定的黃色絡(luò)合物且在405nm處有大吸收,黃色絡(luò)合物的顏色深淺與HO的濃度在一定范圍內(nèi)具有線性關(guān)系。故可以通過比色計算出HO的含量。
2.化學(xué)氧化還原法:HO與亞鐵離子(如硫酸亞鐵)發(fā)生芬頓反應(yīng),生成的高價鐵離子與顯色劑結(jié)合形成有色復(fù)合物;或通過HO氧化碘化鉀生成碘單質(zhì),碘單質(zhì)與淀粉結(jié)合顯色,成本低,但易受樣本中其他還原劑干擾。
3.熒光法:有的試劑盒采用的原理是HO與熒光探針反應(yīng)生成熒光產(chǎn)物,通過熒光分光光度計檢測熒光強度定量,檢出限更低,適合微量HO檢測。熒光產(chǎn)物的生成不受pH影響,因此,該試劑盒優(yōu)于需要在低pH溶液中測定過氧化氫的其他熒光試劑盒,后者的探針靈敏度降低。
4.POD比色法:過氧化物酶(POD)催化HO氧化顯色底物生成有色化合物,產(chǎn)物吸光度與HO濃度成正比。
過氧化氫測試盒的使用注意事項:
-佩戴手套、護目鏡和實驗服,避免HO接觸皮膚或眼睛。
-在通風(fēng)良好環(huán)境中操作,防止吸入蒸氣。
-實驗室溫度控制在18-25℃,濕度40-60,避免陽光直射干擾熒光檢測結(jié)果。
-反應(yīng)體系需嚴(yán)格控溫,并注意pH值對HO活性的影響。
-移液器需校準(zhǔn),避免氣泡產(chǎn)生;不同樣品使用專用器具,防止交叉污染。
-含HO的廢液需按實驗室安全規(guī)程處理,不可隨意傾倒。
-即用型試劑使用前平衡至室溫,避光保存;需稀釋的試劑應(yīng)準(zhǔn)確配比。
-過期或配置超時的試劑禁止使用。
-設(shè)置空白對照和標(biāo)準(zhǔn)曲線,每組樣本建議重復(fù)測定以提高數(shù)據(jù)可靠性。
